Akademik Veri Yönetim Sistemi
DİLEK E. (Yürütücü), SHIRINZADEH H., AKMAN E.
Yükseköğretim Kurumları Destekli Proje, 2020 - 2021
Enzimler canlı sistemlerdeki metabolizmayı oluşturan tüm biyokimyasal reaksiyonlarda
görev yapan biyolojik katalizörlerdir. Karbonik anhidraz (E.C.4.2.1.1) insan
eritrositlerinden elde edilirken asetilkolin esteraz (AChE, asetilkolin asetilhidrolaz, EC
3.1.1.7) ise hazır olarak temin edildi. Çalışmanın ilk basamağı olarak karbonik anhidraz
izoenzimi I ve II (hCA I ve hCA II) üzerine in vitro etkileri araştırıldı. İlk önce hCA I ve
hCA II izoenzimlerini saflaştırmak için Sepharose-4B-L-Tirozin afinite kolon
kromatografisi kullanıldı ve saflığını belirlemek için, SDS-PAGE yapıldı. hCA I ve hCA II
enzoenzimlerinin indol türevi Schiff bazı bileşiklerinin inhibisyon etkileri incelendi ve Ki
ve IC50 değerleri hesaplandı. hCA I ve hCA II üzerine inhibisyon etkileri esteraz aktivite
metodu ile araştırıldı. Çalışmanın son basamağında ise AChE’nin indol türevi schiff bazı
bileşiklerinin inhibisyon özelliği araştırıldı. İnhibisyon çalışmaları Ellman metoduna göre
yapıldı. Her bir madde için IC50 ve Ki değerleri hesaplandı. Bu bileşiklerinin enzimleri
önemli ölçüde inhibe ettiği gözlendi. Çalışmada IC50 ve Ki değerleri hCA I izoenzimi için
sırasıyla 38.50-231.05 nM ve 36.18 ± 3.07- 224.29 ± 5.78 nM aralığında olduğu belirlendi.
Aynı parametreler hCA II izoenzimi için 33.01-216.28 nM ve 31.30 ± 2.63-201.64 ± 7.25
nM aralığında hesaplandı. Asetazolamit (AAZ) İnsan Karbonik Anhidraz I ve II
izoenzimleri için pozitif kontrol olarak kullanıldı. Çalışmanın bu basamağında Asetilkolin
esteraz IC50 ve Ki değerlerinin ise 31.84- 135.90 nM ve 6,82 ± 0,72 - 110,30 ± 9,26 nM
aralığında olduğu belirlendi ve AChE enzimi için pozitif kontrol olarak Takrin kullanıldı.